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    奧林巴斯顯微鏡:暗視野顯微鏡故障排除

    2020-09-04 09:30:35

    有許多相關(guān)的常見問題與暗視野顯微鏡和顯微攝影或數(shù)字成像。 這些范圍從使用不正確的大小視場光闌足夠的照明和聚光鏡失準(zhǔn)。 暗場照明問題都與臺下聚光器,這應(yīng)該是第一個問題,當(dāng)事情不正常工作。 成像標(biāo)本時使用這種技術(shù),下面的問題和解決辦法應(yīng)作為一個指南。



    問題: 
    有足夠的照明,使樣本可見,,或試樣是可見的,但非常微弱的。


    解決方案 :燈電壓可設(shè)置得太低,或燈泡可能沒有足夠的強(qiáng)度,以適當(dāng)?shù)卣樟猎嚇印?nbsp;最多約12伏的電壓升高(為12伏,100瓦鎢鹵素?zé)襞荩┗蚋鼡Q光源,如果可能的話,與一個更大的強(qiáng)度。 如果不解決這個問題,檢查臺下聚光器,以確保其適當(dāng)?shù)拇笮∨c視場光闌的正確定位。 另外,檢查的顏色和/或中性密度濾光片,偏光片,相位差板,或任何其他組件,可能減少照明強(qiáng)度的光路徑。 

    如果這個問題出現(xiàn)高數(shù)值孔徑反映聚光鏡,檢查聚光鏡頂級鏡頭是正確的顯微鏡幻燈片底部的油。 如果浸沒接觸已被打破,重新把聚光鏡油和架起來,直到頂端透鏡完全浸在油中,并在與底部的滑動接觸。




    問題: 
    視野有一個黑點(diǎn)在中心,減少光照強(qiáng)度,但在外圍的對象是良好的照明和顯示正常。


    解決方案 :要么是不正確的位置臺下聚光器或光站的物鏡是錯誤的大小。 小心地機(jī)架物鏡向上和向下,同時觀察在視野標(biāo)本。 進(jìn)行檢查,以一定的,兩個聚光鏡光圈和視場光闌被設(shè)置為敞開位置。 如果這并不影響照明,使它稍大或稍小的改變視場光闌的大小,然后重新檢查照明。 

    有時候,這個問題產(chǎn)生,當(dāng)顯微鏡載玻片過厚(更大的比標(biāo)準(zhǔn)1毫米的)。 使用千分尺或一組表卡尺來確定的厚度的滑動和滑動/蓋玻片組合。 如果滑動過厚時,要么改變正確的厚度的滑動或者“檢查聚光鏡,以確定它是否可以進(jìn)行調(diào)整,以補(bǔ)償不同厚度的幻燈片。




    問題: 
    燈往往有一個很短的壽命,并與黑色蒸發(fā)鎢涂層的燈泡內(nèi)部的燒結(jié)。


    解決方案 :在過高的電壓很長時間,這肯定會減少壽命的燈泡已使用。更換燈泡和燈電壓降低后觀察和/或試樣的顯微攝影。




    問題: 
    圖像具有的明視野周邊帶或不帶在中心的暗區(qū)。


    解決方案 :這個問題是典型時,臺下聚光器錯誤地居中或視場光闌是太小了。 恢復(fù)到明視場,并重新建立的科勒照明條件,然后重復(fù)暗場過程中,確保聚光鏡的中心。 如果這沒有幫助,增加視場光闌的大小,直到適當(dāng)?shù)陌祱鰲l件成立。 

    這個問題也可能出現(xiàn)時使用的物鏡,過高的暗場聚光鏡的數(shù)值孔徑。 如果在物鏡內(nèi)部有一個可變光闌,降低光圈孔徑的大小來確定,如果太多的斜光進(jìn)入的物鏡前透鏡。 此外,它可能有助于提高到一個更高的數(shù)值孔徑反射的暗場聚光鏡的視場光闌的大小或更改。




    問題: 
    僅在一側(cè)的外圍的視野是光明的。


    解決方案 :檢查物鏡轉(zhuǎn)換器,以確保物鏡被正確地定位在光軸的顯微鏡。 有一個定位的物鏡是適當(dāng)?shù)奈恢脮r停止,將產(chǎn)生一個正的“啪嗒”。 如果不正確的中心視場光闌,也可能會出現(xiàn)的問題。 取下目鏡,并把相望遠(yuǎn)鏡的眼睛管(或使用伯特蘭透鏡),然后使用中心的螺絲以正確對齊視場光闌。



    問題: 
    圖片的標(biāo)本不明確,缺乏足夠的對比度和細(xì)節(jié)。


    解決方案 :暗視野顯微鏡的樣本可能不適合。 許多染色標(biāo)本不分散足夠的光線暗場條件下可以清楚地成像。 試樣的厚度,也可能是一個問題,因?yàn)榉浅1〉臉悠吠怀上褚约皬陌狄曇?/span>聚光鏡發(fā)射與傾斜光線。 切換到明場,相襯,DIC,霍夫曼調(diào)制對比度,以確定這是否提高了標(biāo)本的對比。




    問題: 
    明亮的區(qū)域,重點(diǎn)阻撓的暗場標(biāo)本的觀察和/或顯微攝影。


    解決方案 :這可能是由于灰塵,頭發(fā),纖維,和/或聚光鏡上方某處的光學(xué)表面的臟物污染。 徹底清潔標(biāo)本的光學(xué)級組織或棉花。 有時候,這個問題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。 小心地松開物鏡,其所在地的消防水***,慢慢地打開,而通過目鏡觀察樣品。 如果阻塞隨著旋轉(zhuǎn)的物鏡,那么它可能是由于灰塵上的前透鏡。 刪除的物鏡和滋潤鏡頭前輕輕地呼氣,然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長木桿。 更換的物鏡和檢查,以一定的阻礙已被完全刪除。




    問題: 
    均勻地照亮的背景,但不是全黑或出現(xiàn)灰色的顏色。


    解決方法 :這個問題通常發(fā)生在不透明的場站為物鏡太小。 取出的目鏡和查看的后焦平面上的一個光路中的樣本的情況下,無論是用相位望遠(yuǎn)鏡或伯特蘭透鏡的物鏡。 整個背部焦平面應(yīng)該是黑暗的,沒有任何邊緣明亮的光線出現(xiàn)在周圍。 如果觀察到的光的弧或圓中的物鏡的后焦平面上,改變到一個稍大的視場光闌。 此外,降低視場光闌的大小,將有助于在抑制眩光和一個烏黑背景,(注意不要關(guān)閉虹膜光圈太多)。



    問題: 
    聚光鏡的圖像部分地填充視野,遮蔽試樣的細(xì)節(jié)。


    解決方案 :可調(diào)節(jié)的滑動可能太薄或聚光鏡的太高。 測量厚度的顯微鏡幻燈片進(jìn)行檢查,以確定油接觸不破。 如果遇到困難,保持底部的幻燈片油,請嘗試使用較厚的幻燈片。




    問題: 
    顏色出現(xiàn)在背景中,或用灰鑄鐵的背景光線不均。


    解決方法 :這個問題經(jīng)常發(fā)生在整個很厚的坐騎,或過多時,散射光污染工件的安裝介質(zhì)中捕獲。 倒閉的視場光闌和旋轉(zhuǎn)標(biāo)本,以找到最好的方向,然后確定問題是否已得到糾正。 試樣可以被重新安裝在較薄的裝載或安裝介質(zhì),可能需要進(jìn)行過濾。 用柔軟的鏡頭紙或棉簽小心地清潔整個的顯微鏡載玻片和蓋玻片。




    問題: 
    查看水生生物的在水性安裝,標(biāo)本漂在一個單一的方向不斷,難以觀察和顯微攝影。


    解決方案 :對流電流正在創(chuàng)建在蓋玻片的邊緣由于緩慢蒸發(fā)。 放置的胎圈,凡士林或Cytoseal安裝牢固地密封到顯微鏡載玻片上的周圍介質(zhì)的外周的蓋玻片。 商業(yè)產(chǎn)品是可用的,可以被加入到水中,以減緩這些微小的生物體的運(yùn)動,使得它們更容易拍攝。




    問題: 
    當(dāng)觀看試樣通過10x物鏡,有一個長橢圓形的光點(diǎn)的中心的視野。


    解決方案 :聚光鏡可能被錯誤地聚焦或擴(kuò)散過濾器可能會丟失,導(dǎo)致的圖像出現(xiàn)在視野的燈絲。 重新聚焦在聚光鏡和作出若干光路中的過濾器是一種擴(kuò)散。




    問題: 
    視野有亮點(diǎn),有問題的樣本與實(shí)現(xiàn)大家關(guān)注的焦點(diǎn)。


    解決方案 :小氣泡可能被困在聚光鏡的頂部和底部的顯微鏡載玻片之間的油。 取出的目鏡(或插入伯川德透鏡)觀察的后焦平面上的物鏡,其中的氣泡將是可見的。 為了彌補(bǔ),打破油接觸,并用棉簽除去殘留的氣泡。清潔聚光鏡的前鏡頭與顯微鏡玻片上多余的油,然后申請一個干凈的滴油的鏡頭。 如果問題仍然存在,徹底清潔所有的光學(xué)表面,然后再重新將油。




    問題: 
    在高放大倍率,膠體粒子顯示不完整的牛頓環(huán),并出現(xiàn)不均勻的照明。


    解決方案 :聚光鏡可能是偏離中心。 切換到低功耗的物鏡和中心聚光鏡。 仔細(xì)檢查,以確定更高的功率物鏡是否具有不同的中心,及若有,顯微鏡光軸中心的物鏡