徠卡顯微鏡:激光顯微切割的歷史
激光顯微切割的精確分離的樣品,用聚焦的激光束的顯微鏡操控技術(shù)。這種技術(shù)提供了一個(gè)精確的和無(wú)污染的解決方案的單個(gè)細(xì)胞或組織的分離和篩選。今天,它是一個(gè)既定的方法,大量的應(yīng)用,主要是在分子生物學(xué),特別是核酸研究,神經(jīng)科學(xué),發(fā)育生物學(xué),癌癥研究,取證,蛋白質(zhì)組學(xué),植物研究,切割細(xì)胞培養(yǎng)和單細(xì)胞隔離。
現(xiàn)代激光顯微切割技術(shù)有它的根在20 日世紀(jì)初。它已經(jīng)穩(wěn)步推進(jìn),多年來(lái)修改。下面的文章是從它的起源到今天的**的激光顯微切割的歷史的總結(jié)。
從“Strahlenstich”的方法,以激光顯微切割
早在1912年,所謂的“Strahlenstich”方法被用來(lái)將光線聚焦在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)顯微,標(biāo)志著實(shí)驗(yàn),*終導(dǎo)致激光顯微切割(Tschachotin,1912)。
然而,這是1962年之前Bessis和伯雷特哈恩等人。輻照樣品紅寶石激光器(Bessis)的和紫外線激光束(伯雷特哈恩)切割組織。到那時(shí),它已經(jīng)可以使用激光束作為顯微工具解剖造成重大損害周圍組織細(xì)胞,而不產(chǎn)生的電弧光(Bessis伯雷特哈恩,1962年,1962年)。
伊森伯格等。人。也應(yīng)用這項(xiàng)技術(shù)為他們的實(shí)驗(yàn):一個(gè)萊茨Orhtplan程序顯微鏡的野生藍(lán)幟公司(現(xiàn)在徠卡顯微系統(tǒng)),一個(gè)高能量的氮激光,今天的紫外線激光的前體,是用于分離肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白纖維從的周圍的細(xì)胞質(zhì)(等人伊森貝里,1976)。
帕塔基等人在1987年,還出版了*的成績(jī),他們的研究在激光顯微切割。在這里,組織進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)手冊(cè)制備取代的顯微鏡用激光單元的組合。這個(gè)零件包括? 2的脈沖激光和連續(xù)波氦氖激光。生成的N 2激光,氦氖激光被用來(lái)標(biāo)記目標(biāo),并在紅色光譜范圍的光學(xué)調(diào)整所需的激光功率。在這里,激光能量被利用作為一個(gè)非常小的組織樣本(帕塔基等人,1978)的分析工具。
與以前的手工制備相比,用激光束切割的組織是在再現(xiàn)性方面帶來(lái)了巨大的改進(jìn),更高的精度和節(jié)省時(shí)間。
然而,在當(dāng)時(shí),科學(xué)家們與酶閑置切割邊緣的變化引起的問(wèn)題。此外,這是*可能的進(jìn)行光學(xué)分析,PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù),仍是未知的。所以,雖然它已經(jīng)存在在上述與利時(shí)Orhtplan程序描述配置中,該技術(shù)在商業(yè)上不可行。其遙遙*,它陷入遺忘。
激光技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,導(dǎo)致突破
在九十年代中期,在此期間的技術(shù)進(jìn)步已經(jīng)取得了使邁克爾·埃默特巴克和他的團(tuán)隊(duì)在美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院和美國(guó)國(guó)家癌癥研究所(馬里蘭州貝塞斯達(dá)美國(guó))開(kāi)發(fā)另一個(gè)激光顯微切割技術(shù)。二氧化碳激光結(jié)合的聚合與一種透明的熱塑性膜(乙烯-醋酸乙烯酯聚合物),該技術(shù)涉及的透明的熱塑性塑料膜的應(yīng)用程序的組織部分(完全與樣品接觸的表面),可以安裝在傳統(tǒng)的搏命。當(dāng)聚合物用激光照射,加熱和液化,擴(kuò)展到空腔中與它的組織切片和定影膜,從而將選擇的細(xì)胞/細(xì)胞聚集。這些可以被刪除從標(biāo)本幻燈片(埃默特-巴克等人,1996)。
立即采用該系統(tǒng)的進(jìn)一步發(fā)展和市場(chǎng)營(yíng)銷大角與不同類型的細(xì)胞形態(tài)和表型的分離和分子分析的目的。漸漸地,進(jìn)一步的系統(tǒng)出現(xiàn)在市場(chǎng)上,如棕櫚微束系統(tǒng)和LMD系統(tǒng)由徠卡顯微系統(tǒng)公司。
成立于各種各樣的應(yīng)用的激光顯微切割
今天,徠卡公司的激光顯微切割系統(tǒng)在市場(chǎng)上使用,這也是一個(gè)堂堂正正的顯微鏡特別適用于細(xì)胞培養(yǎng)工作。徠卡顯微系統(tǒng)也是*的光學(xué)儀器公司已經(jīng)開(kāi)發(fā)出一種專有的激光模塊,激光顯微切割原理。徠卡LMD系統(tǒng)的顯著特點(diǎn)是結(jié)合了**的激光控制和接觸和污染免費(fèi)回收的dissectate材料的利用重力的作用。這樣的組合也從復(fù)雜的異構(gòu)組織提供迷人快速的收集純的起始材料。徠卡公司一直以來(lái)在市場(chǎng)上推出的徠卡在2000年的LMD,同時(shí)該公司已發(fā)行新一代激光顯微切割系統(tǒng)徠卡LMD6500和徠卡LMD7000的形式。
激光顯微切割系統(tǒng)提供了廣泛的應(yīng)用光譜分子生物學(xué),特別是核酸研究,神經(jīng)科學(xué),發(fā)育生物學(xué),細(xì)胞培養(yǎng),癌癥研究,免疫學(xué),法醫(yī)學(xué),蛋白質(zhì)組學(xué),植物和氣候研究。