去的沖動(dòng)深入到微觀世界，導(dǎo)致研究人員的光學(xué)顯微鏡（LM）的多功能性與電子顯微鏡（EM）的分辨能力，產(chǎn)生相關(guān)光學(xué)和電子顯微鏡（CLEM）相結(jié)合。為細(xì)胞生物學(xué)研究的CLEM最顯著和強(qiáng)大的特性是用兩種不同的顯微鏡平臺(tái)，研究同一細(xì)胞的能力。

必備知識(shí)簡(jiǎn)報(bào)，由Wiley父子與徠卡的合作出版，描述了CLEM的基礎(chǔ)知識(shí)，并檢討潛在的缺陷及問(wèn)題，以及技巧來(lái)解決它們。

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因?yàn)椴皇撬械倪m合于LM標(biāo)記可以生存涉及樣品制備的嚴(yán)酷過(guò)程，一些CLEM技術(shù)利用低溫方法。雖然這些技術(shù)排除觀察活細(xì)胞的動(dòng)態(tài)，在2008年的方法，發(fā)現(xiàn)活細(xì)胞的數(shù)據(jù)結(jié)合EM。為了使CLEM更加人性化染色的結(jié)構(gòu)適合于LM和EM的方式是很重要的。有幾個(gè)辦法已經(jīng)制定，包括適用于電磁考試的第一個(gè)基因編碼的熒光蛋白。進(jìn)一步的努力投入，想盡辦法得到準(zhǔn)確的圖像對(duì)準(zhǔn)，以確保完全相同的單元格的LM和EM下觀察。加快CLEM處理，主要是由于存在的問(wèn)題，以從LM轉(zhuǎn)移樣品至EM進(jìn)行分析，幾個(gè)自動(dòng)化的方法已經(jīng)被提出。提出三個(gè)案例研究的基本知識(shí)簡(jiǎn)介說(shuō)明如何CLEM的挑戰(zhàn)已得到滿(mǎn)足。

盡管在建立CLEM進(jìn)步的一些重大問(wèn)題依然存在：當(dāng)從LM轉(zhuǎn)移樣本的EM定位感興趣區(qū)域的困難，進(jìn)一步推動(dòng)如何成長(zhǎng)的細(xì)胞，缺乏探頭和技術(shù)的兼容性和風(fēng)險(xiǎn)的挑戰(zhàn)污染和由于耗時(shí)的處理?yè)p害。

今后，CLEM可能會(huì)被新的超分辨率顯微鏡技術(shù)的補(bǔ)充，因?yàn)檫@些都是容易與EM整合。的相關(guān)技術(shù)的范圍將擴(kuò)大，并包括其他復(fù)雜的顯微技術(shù)。目前，研究人員正試圖開(kāi)發(fā)CLEM一個(gè)探頭。一個(gè)顯著的進(jìn)步將是市售的所有功能于一身的解決方案CLEM的發(fā)展。